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使用血清前需要对其进行灭活吗?
点击次数:1405 更新时间:2019-11-15
 
  血清:血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆zui大的区别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。
  对于大多数细胞的培养而言,是不需要的加热灭活的。但在免疫学研究、ES细胞培养、昆虫细胞和平滑肌细胞培养时推荐使用灭活血清。加热血清可以灭活血清中被激活的补体,但同时也会破坏热不稳定的蛋白。热灭活血清对细胞的生长只有微小的促进作用,甚至会因为灭活不当,破坏血清的品质,而抑制细胞的生长。
  按照正确的解冻方式*解冻血清,使其恢复到室温。将血清分装成50mL进行灭活。对于一次需要灭活500mL的操作,可以将一个相同体积的容器放置在水浴锅中,中间插入温度计,作为参考。当温度达到56℃时,加热30min进行灭活。
  正常血清有时候中会出现一些絮状的沉淀,这些絮状物一般是纤维蛋白和脂蛋白的沉淀,不会影响血清的品质,可以通过在4℃混匀后静置1h,400g离心5min去除。

沪公网安备 31011802001676号

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