Magbind Gel Extraction Kit
磁珠法琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒
目录号：K2515
运输条件：室温（15-25℃）。
保存条件：Magbeads 2-8℃，其他组分室温。
Size | 48 prep | 4×96 prep |
Buffer MG | 45 ml | 3×120 ml |
Buffer MW1 (concentrate) | 13 ml | 2×52 ml |
Buffer EB | 12 ml | 48 ml |
Magbeads | 1 ml | 8×1 ml |
组分说明
本产品仅供科研使用，请勿用于临床诊断及其他用途
产品简介
本试剂盒提供了一种简单、快速、高效的用于琼脂糖凝胶 DNA回收的方法。它可
以从用TAE或TBE制成的琼脂糖凝胶中回收100 bp以上的DNA片段，回收效率高达80%。
溶胶液将琼脂糖胶溶解后，磁珠选择性的吸附 DNA片段。经漂洗后，洗脱得到的 DNA
纯度良好，可用于测序、酶切、PCR、克隆等下游实验。
该试剂盒可与液体工作站或KingFisher核酸提取仪配套使用，简单、快速的进行大
规模提取，大大降低了实验者的工作量和实验中的人为误差。
说明
Time for1 sample Time for 96 samples
Sampletype Typical yield DNA size (handle) (BioRobot)
Agarose Gel Up to 80% 100 bp plus 40 min 1-2 hour
实验前准备及重要注意事项
1. Magbeads严禁冰冻 、离心。水冻和离心可能会对Magbeads造成不可逆的损害。
2.电泳时使用新的电泳缓冲液，以免影响电泳和回收效果。
3.切胶时，紫外照射时间应尽童短，以免对DNA造成损伤。
4.第---次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer MW1中加入无水乙醇并做好标记。
5. Magbeads在使用前一定要涡旋震荡2啾使其充分混匀。
6.如Buffer MG中出现沉淀，请在56C水浴锅中重新溶解，摇匀后即可使用。
7.实验步骤4、6、8和12中用Thermomixe!震荡的目的是为使磁珠充分悬浮于溶液中，
以便使磁珠能够充分吸附核酸，将磁珠表面的杂质充分去除或将核酸从磁珠表面充
分洗脱。不同厂家生产的Thermomixe震荡效果不同，如1400 rpr时不能使磁珠充
分混匀，请调节震荡频率直至磁珠能够充分混匀。
自备试剂
1.加热恒温混匀仪一建议使用 Thermo Fisher设计生产的Thermomixero
2.磁力架一建议使用DynaMag"M_
3.无水乙醇、75%乙醇。
操作步骤
1.在长波紫外灯照射下将目的条带从琼脂糖凝胶中切下(尽童去除多余琼脂糖胶)，
称重后将其放入干净的1.5 m离心管中。
2.向上-步的离心管中加入3倍胶体积的Buffer MG (如果胶块重0.1 g, 其体积视为
100!)后，将其放入50C、1400 rpr的Thermomixe中震荡溶胶10分钟。
注意:如无Thermomixer.可将高心管放于50仁水浴锅或金属浴中孵有10分钟。期间每隔2分钟涡旋展荡5秒钟。
3.将上-步的离心管从Thermomixe中取下，检测腋块是否*融化以及溶液是否由黄
色变成紫色(如胶块未*溶解，继续在Thermomixer中震荡融解5分钟;如溶液变
成紫色，向离心管中加入10以3 M的醋酸钠溶液)。短暂离心后将其室温放置5分钟。
4.向上-步离心管中加入20以Magbeads, 涡旋震荡5秒钟后将其放入25C、1400 rpml
的Thermomixe中震荡结合5分钟。
注意: 1) 如果溶液总体积大于1ml.每增加100p!可向高心管中多加入2 y的Megbeds:如果溶
液总体积小于0.5 ml.可将Magbends的用量减少至10 以
2)如无Themomiser.可将高心管连续额倒混匀10分钟。
5.将上- -步的离心管放于磁力架上静置1份钟，待Magbeads*吸附于离心管的侧壁
上后*弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上)，期间避免接触Magbeadso
6.向离心管中加入500以Buffer MW1 (加入前检测是否已加入无水乙醇)后，将离心
管从磁力架上取下，涡旋震荡秒钟后放入25C、1400 rpr的Thermomixe中震荡3分钟。
注意:如无Thermomixer. 可将高心管涡旋层荡10秒钟使Megbead流分悬浮于源洗液中。
7.将上- 步的离心管放于磁力架上静置1份钟，待磁珠*吸附于离心管侧壁上后轻
轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后*弃去溶液(保持离心管固定于磁力架
上)，期间避免接触Magbeadso
注意:弃去溶液时。如高心管董上有残留溶液。需用移液器进一步去除。
8.向离心管中加入600 μl 75%的乙醇后，将离心管从磁力架上取下，涡旋震荡5秒钟后
放入25C、1400 rpm的Thermomixe中震荡3分钟。
注意:如无Thermomixer. 可将高心管满旋层荡10秒钟使Magbeads充分悬浮于漂洗液中。
9.将上一步的离心管放于磁力架 上静置1份钟，待磁珠*吸附于离心管侧壁上后轻轻
颠倒磁力架，将离心管盖上的杂质洗落后*弃去溶液(保持离心管固定于磁力架
上)，期间避免接触Magbeads。
注意:弃去溶液时。如高心管盖上有残留溶液。需用移液暴进一步去除。
10.重复步骤8-9。
11.保持离心管固定磁力架上，用10ul移液器进一步去除离心管管底和管盖上的溶液后室温放置10分钟。
12．向离心管中加入30-100 μl Buffer EB或去离子水，将离心管从磁力架上取下，涡旋
震荡使Magbeads*悬浮于洗脱液后将其放入65℃、1400 rpm的Thermomixer中震荡洗脱10分钟。
注意：如无Thermomixer，可将离心管放于65℃水浴锅或金属浴中孵育10分钟，期间每隔2分钟涡旋震荡5秒钟。
13．将上一步的离心管放置于磁力架上静置 2分钟，待Magbeads*吸附后用移液器
将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用，此时可以弃去Magbeads。
纯化回收得率的计算
我们建议通过琼脂糖电泳纯化前后的样品进行回收得率的计算。不建议通过260
nm处的光吸收值来计算回收得率。因为溶液中单链、双链 DNA和dNTP以及一些纯化
前的某些杂质在260 nm处都有光吸收，这样在计算回收前样品中 DNA浓度时会得到一
个假的、虚高的DNA浓度值。
