口腔/咽拭子基因组DNA快速提取试剂盒

Rapid Swab DNA Kit

保存条件：本试剂盒在室温储存 12 个月不影响使用效果. 蛋白酶 K 可室温运输，建议-20℃长期保存。

产品介绍：

本试剂盒采用特制的进口DNA 吸附柱和*的缓冲液系统，特别适合于从口腔咽拭子中分离纯化基因

组DNA。各种来源样品裂解消化处理后 DNA 在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜（特

别配备了 Carrier RNA 可以从体系中轻松捕获微量核酸），再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，将盐、

细胞代谢物、蛋白等杂质去除，后低盐的洗脱缓冲液将纯净的基因组 DNA 从硅基质膜上洗脱。纯化后的

DNA 无杂质和 PCR 抑制剂，可直接适用于PCR 分析。

产品特点：

• 配备了 Carrier RNA 用于充分收集特别微量DNA。
• 提取的 DNA 纯度高，质量稳定可靠，可适用于各种常规操作，包括 PCR、酶切、测序、Southern 杂交等。

注意事项：

1. 结合液 CB 或者抑制物去除液 IR 低温时可能出现析出和沉淀，可以在 37℃水浴几分

钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。

2. 避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、氧化、pH 值变化。

3. Carrier RNA

1） Carrier RNA 使用方法：如果起始处理量很少（口腔咽拭子上收集到的细胞很少），我们推荐使用 Carrier RNA，如果预期有较大量 DNA 产量，用户可以根据需要选择是否加入 Carrier RNA。使用时每个样品提取所需结合液 CB 中加入 1μl Carrier

RNA 储存溶液， 将结合液 CB 与 Carrier RNA 溶液充分颠倒混匀即可(结合液 CB 容易起泡沫,请勿使用涡旋振荡混匀)。也可根据样品数量，在总共需要的结合液CB 中加入总共需要的 Carrier RNA 混匀备用。混合液在室温 24 小时内稳定。

• Carrier RNA 加入过多造成 DNA 洗脱液中 Carrier RNA 浓度过高，下游 PCR 反应可能受干扰，加入过少可能并不能帮助提高 DNA 产量和 PCR 敏感度，因此加入量应该在具体试验中调整以得到-*佳效果。

自备试剂：无水乙醇

操作步骤：

提示：第-*次使用前请先在15ml 漂洗液 WB 中加入 60ml 无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框

打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!

取样：取一根医用消毒棉签（手不要碰触脱脂棉部位），伸进口腔，紧靠脸颊内侧来回刮拭20 次（不

时旋转棉棒），需充分接触口腔粘膜。

注意事项：避免用手触及棉签，采集前可先用清水轻轻漱口。为防止样本被食物或者饮料污染，取样前

30 min 内应该避免进食或者饮水。

1. 用剪刀将棉签部分从其杆上剪下，放入2ml 离心管中，加入400μl 裂解液 ML。

2. 再加入 20μl 的蛋白酶 K (20mg/ml)溶液，立刻涡旋振荡充分混匀，56℃放置 30 min，期间每 10 min 涡

旋混匀 10 sec。

3. 加入 400μl 结合液 CB，立刻涡旋振荡充分混匀，70℃放置 10 min（挤压去除拭子， 将尽可能多的裂

解液转移至新的离心管中）。

如果拭子上细胞数量少，导致提取的基因组 DNA 产量过低, 可以在400μl 结合液CB中加入 1μl Carrier RNA 储存溶液。

4. 冷却后加 200μl 无水乙醇，立刻涡旋振荡充分混匀。简短离心以除去管盖内壁的液滴，收集所有的液体

到管底。（如果周围环境高于 25℃,乙醇需要冰上预冷后再加入）