DAB显色试剂盒（20×）说明书

   DAB Kit（20×）

   DAB显色试剂盒（20×）

   目录号：K0125

   保存条件：2-8℃保存。

   组分说明

                    Cat. No.                            K0125        K0125A

                    Kit Size                              20 ml         60 ml

                    DAB-试剂  A（20×）    1 ml           3 ml

                    DAB-试剂  B（1×）      20 ml         60 ml

   产品简介

    DAB（3,3′N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride）是辣根过氧化物酶（HRP）

的常用底物，在辣根过氧化物酶的催化下，DAB会产生不溶于水和乙醇的棕色沉淀。

该试剂盒适用于HRP系统的的免疫组化中的组织切片、细胞爬片以及Western  Blot中

PVDF膜、NC膜等的染色。辣根过氧化物酶可以催化底物DAB在目的蛋白所在的位置

转变为褐色的化合物，可根据颜色反应来确定目的蛋白的位置及表达情况。

    注意事项

 1．工作液现配现用，配制好的工作液2-8°C避光1小时内有效。

 2．工作液用量必需充足，保证*覆盖组织片或印迹膜。

 3．显色后的组织切片或细胞爬片可用苏木精或甲基绿复染。

 4．对于组织切片，以每张切片用50 µl显色工作液计算，1  ml  20×DAB为400张切片的用量，3 ml为1200张切片的用量。

    5．为获得Z佳实验结果，请务必优化实验条件。

 6．显色后若背景太深，可以考虑延长封闭时间，避免非特异性染色，或者缩短  DAB的

    显色时间；显色后若显色太弱或没有显色，可以考虑增加一抗或二抗的浓度，或者

    适当延长显色时间。

    7．DAB为可疑致癌物，使用时请采取必要的防护措施。

    8．本产品仅用于科研，不能用于人体反应或人体治疗。

    使用方法

1．DAB显色工作液配制：根据需要量，将试剂A和试剂B以1：19的体积比混匀后即为

    DAB显色工作液。也可选择每毫升试剂B中滴加1滴（约50 µl）试剂A，混匀即可。

2．显色：1）印迹膜显色：将配制好的工作液滴加在印迹膜上（或将印迹膜倾入到DAB

    工作液中）即可显色。显色时间一般为  1-5分钟。显色完毕后，将膜浸入水中，终

    止反应。

     2）组织切片或细胞爬片显色：加适量的  DAB显色工作液于需要显色的组织切片或

     细胞爬片上即可显色，显色时间一般为  1-5分钟。显微镜下观察控制显色时间，当

     达到最佳显色效果后，自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明，封

     片后可长期保存。

实验代做服务：