家畜用囊虫抗体检测试剂盒说明书
【产品名称】
通用名称:家畜用囊虫抗体检测试剂盒
英文名称:Cysticercus(Cyt)Antibody Test Kit for Livestock
【包装规格】96份/盒
【预期用途】本试剂盒采用夹心法 ELISA定性检测家畜血清或血浆中的特异性囊虫抗体,
可作为囊虫病辅助检测。
【检测原理】如果待检样品中含有囊虫抗体,就会与包被板上的囊虫抗原及第二步加入的囊
虫抗原酶标结合物特异性结合。间接结合在包被板上的囊虫抗原酶标结合物与底物反应的
显色状况即可反映出样品中是否含有囊虫抗体。
【储存条件及有效期】2~8℃保存,防止冷冻,有效期为 12个月。
【适用仪器】含 450nm和 630nm波长酶标仪;37℃恒温设备;可调微量移液器。
【样品要求】
1.本试剂仅适用于检测牛、羊等家畜血清或血浆。
2.为取得最佳实验效果,避免使用含叠氮钠、高血脂、长菌以及严重溶血的样品;
3.短期(3天内)将进行检测的血清样品可存放于 2~8℃;如需长期保存,应置于-20℃
以下,避免反复冻融。
【检验方法】
1.加稀释液:每孔加样品稀释液(5号液)2滴。
2.加样反应:样品孔,每孔仅加入 10μL待检样品;阴性对照 2孔,每孔仅加入 10μL阴
性对照品;阳性对照 2孔,每孔仅加入10μL阳性对照品。盖好封板膜,37℃避光反
应 30分钟。
3.洗板:甩去孔内液体,每孔加洗涤液(2号液)1滴,立即用蒸馏水注满,静置 30秒
后甩去;再直接用蒸馏水洗涤四次,每次均需静置 30秒;最后一次甩去拍干。
4.加酶反应:每孔加酶标结合物(1号液)2滴,盖好封板膜,37℃避光反应 30分钟。
甩去孔内液体,如上洗板,拍干。
5.显色反应:加底物(3号液)和显色剂(4号液)各 1滴,混匀,37℃避光显色 10分
钟
6.终止反应:加终止液(6号液)1滴,用酶标仪于 450nm波长(630nm作为参比波长)
读取 OD值。
【参考值】
1.Cut-off值 (COV)=阴性对照平均 OD值×2.1 (阴性对照孔 OD值<0.05时,按 0.05计)。
2.有效性判定:
阴性对照孔 OD值≤0.15(若大于 0.15则实验无效);
阳性对照孔 OD值≥0.50(若小于 0.50则实验无效)。
【检验结果的解释】
样品 OD值≥COV,判为囊虫抗体阳性;
样品 OD值<COV,判为囊虫抗体阴性。
【检验方法的局限性】本试剂盒仅供筛查,不作为确诊依据。
【注意事项】
1.试剂盒各组份从冷藏环境中取出时,必须平衡至室温后,方可开封启用。未使用完的
试剂组份应及时放回 2~8℃密封保存。
2.加试剂前应将试剂轻摇、混匀。
3.孵育时必须用封板膜密封板孔,封板膜不可以重复使用。
4.不同批次试剂盒的试剂组份或说明书不可混用。瓶盖每次使用后要盖紧,各瓶之间瓶
盖不可混用。
5.用弃的试剂盒及样品都应按污染物妥善处理。试剂盒内终止液有腐蚀性,须小心使用。
【储存条件及有效期】 2~8℃保存,防止冷冻,有效期为 12个月。
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