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酶活性测定具有重要的理论与实用意义
更新时间:2021-01-26 点击次数:3236次
     由于酶具有高度的专一催化活性,故可通过测定其相应的底物或产物浓度变化,或用某一反应产物或反应物浓度变化来确定其酶的活性。一般采用电化学和光物理的方法,即利用反应物或产物的吸光性,用紫外分光光度法或荧光法测定。若酶反应过程中产物或反应物有气体,则可用测压仪(瓦氏呼吸仪)测定。若反应过程中生成酸,则可用电化学法。用同位素标记的底物则可用放射化学法测定底物浓度变化,计算酶活性。一些性质稳定的酶,也可用高效液相色谱法检测。
  在科学研究、工农业生产和医学实践中经常要进行酶的活性测定,因为机体的机能状况、产品质量的好坏常会在某种或某些酶的含量和活性上得到反映,而这些只有通过活性测定才能确定,因此酶活性测定具有重要的理论与实用意义。这类分析现已广泛用于临床辅助诊断。酶在细胞内合成,各种组织细胞都有体现各自特征的标志酶,这些酶在正常情况下,很少渗出细胞。但当机体发生病变时,它们在组织和体液内的活性就会发生变化,因此,人们可通过检定其中某些酶的活性作为早期诊断、鉴别诊断以及预后的参考。以体液内的酶活性为例,引起其改变大致有以下几种原因。①组织病变导致膜平衡的破坏,如谷草转氨酶(GOT)在心肌中含量高,但心肌梗死情况下,细胞透性增大,因而患者的血清中GOT显著增高,高峰时达正常值的10倍以上。②细胞病变引起合成机能异常,例如,一种称为“血浆特异酶”的卵磷脂胆固醇转酰基酶(LCAT)。它是在肝细胞中合成的,而后分泌到血液中发挥作用,肝炎患者此酶合成下降,因而它在血清中的水平低于正常。③疾病导致酶的分泌排除受阻,使酶转而流入血液中,因而它在血清中酶的活性水平改变。如梗阻性黄疸或癌转移至肝脏使胆管阻塞,故而血清中碱性磷酸酶升高。④药物直接影响酶活性,如有机磷能不可逆地抑制血清中乙酰胆碱酶。

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