更新时间: | 2021-02-04 |
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厂商性质: | 生产厂家 |
提供商: 上海研谨生物服务名称: 明胶酶谱MMP(2/9)检测实验规格: 实验服务价格: 200元周期: 10天左右 收费标准/服务周期/提供结果:欢迎咨询详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。更多实验技术服务请浏览网站其他内容,或来电详询!
明胶酶谱MMP(2/9)检测实验
酶谱法(Zymography) 基于SDS- PAGE电泳和反相凝胶染色的蛋白酶检测方法检测MMP-2、MMP-9活性,灵敏度可达10pg,高于ELISA 方法。
基本原理和程序是:以加有胶原酶底物的SDS-PAGE凝胶分离含蛋白酶的样品,电泳结束后取出凝胶与酶反应Bufer孵育,凝胶染色与脱色。凝胶中由于含底物蛋白而被深染,形成深色背景,但在有蛋白酶条带的位置,蛋白酶将降解凝胶中的底物蛋白,因而不被染色而形成透亮区域,能同时指示MMP-2、MMP-9的位置(酶谱),可检测样本有血液、渗出液、细胞提取物等。
服务周期: 10工作日
结果提供:结果报告、代表性图片,操作流程及相关试剂仪器信息。
明胶酶谱MMP(2/9)检测实验样本提供需知:
1)客户告知实验分组、编号及背景设计资料,具体要求请事先说明;
2)标本收集、保存与运送:
①组织样品:新鲜组织放入液氮或-70 度保存,组织不少于100mg;
②培养细胞:通过细胞计数取不少于2x106个细胞于EP管,加入0.5ml生理盐水,混匀后保存于冰箱(-70°C,避免反复冻融) ;
③血液细胞标本:以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水,保存(-70°C可长期保存,避免反复冻融)
④血清或细胞培养液标本:离心去掉杂质后取上清入EP管,保存(49C可保存15-20 天, -70°C可长期保存,避免反复冻融)
4)样本运输:
①组织样本、细胞样本以干冰运输;
②细胞样本也可直接寄送培养瓶(密封保证不污染、培养液不漏出) ;
③血清或上清液直接加冰袋寄(送视路程远近2 3天可到达)。
客户须知:
检测系统含阳性参照或内参,报价含蛋白提取
实验注意事项:
1.制备聚丙烯酰胺时应注意排除气泡 。
2.明胶酶谱的活性受钙离子,锌离子,和PH值等因素的影响,因此缓冲液 配制应严格准确,尽量用超纯水,孵育温度也掌握好。
3.用大梳子
4.孵育液的PH在7.5-7.6,复性的TRITON时间长了会有絮状物,所以实验时尽量使用新鲜配置的。
5.孵育的37度不要在CO2培养箱中,因为会改变孵育液的PH值,在普通孵箱即可。
6.明胶要4度保存,配好后1周内使用
实验代做服务:
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