| 更新时间： | 2017-03-15 |
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| 厂商性质： | 生产厂家 |
人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒价格公道、*，售后服务完整，并提供免费代检测服务！需要产品说明书及其它详细信息请直接与我们。
产品名称：人单核细胞趋化蛋白4（MCP-4/CCL13）ELISA试剂盒
英文名称：Human MCP-4 ELISAKit
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酶联免疫吸附试验
①直接法 该方法直接利用抗原 与酶联抗体的结合，较简单易行。A.假抗原。在聚苯乙烯酶标版的孔穴中加入待检测的抗原（捕食者胃内含物抽提液）0.2mL，在4℃冰箱中过一夜，使抗原黏附于塑料孔壁上。B.洗涤两次，倒置于干毛巾上，使孔穴中的液体尽量流出。c.加酶联抗体。 各孔穴中加入酶联抗体0.2mL，在mL37℃下孵育3h，使其充分结合。d. 加底物。 用PBS充分洗涤以除去未结合的酶联抗体，然后加入底物（邻苯二胺）0.2 mL，于37℃反应30min，用2mol/L硫酸0.05 mL终止反应。e. 用ELISA检测仪测定其吸光度值，分别设阳性、阴性和空白对照，以确定阳性反应临界值。
②双抗体夹心法 该方法与直接法的不同在于吸附抗体。a. 包被抗体。酶标板的孔穴中加入0.2 mL抗体（用PH=9.6/0.05mol/L碳酸盐缓冲液稀释），置37℃水浴中孵育3h,移入4℃冰箱过一夜。将各孔中多余的抗体倾去，加入PBS洗涤，立即甩去，再将PBS加满各板孔，置5min,甩去溶液，如此洗涤2次，倒置于干毛巾上，使孔穴中的液体尽量流出。b. 加待检抗原。没孔中加入待检捕食者胃内含物抽提液0.2 mL.同时设阳性、阴性和空白（PBS）对照，37℃水溶中孵育3h，转入冰箱中过一夜。如上法洗涤3次。C. 加入酶联抗体。每孔加入酶联抗体0.2 mL，37℃水浴孵育2h，如上法洗涤3次。d. 加底物。 每孔加入底物邻苯二胺0.2 mL, 37℃水浴孵育1h,加入2mol/L硫酸0.05，以终止反应。e. 用 ELISA检测仪测定其吸光度值。
③间接法 与前两种方法不同点在于酶联抗体与抗原的间接结合。a. 每孔加入待检抗原0.2 mL ，4℃冰箱中过一夜，使抗原黏附于塑料孔壁上。并依上法洗涤3次。b. 每孔加0.2 mL,用PBS稀释的抗体，37℃孵育2-3h。c.用PBS洗涤3次后，加入溶于PBS的酶联抗体0.2mL，37℃孵育2-3h。d. 加底物，方法同上。e. 用ELISA检测.
实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人单核细胞趋化蛋白-4（MCP-4）水平。用纯化的人单核细胞趋化蛋白-4（MCP-4）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入单核细胞趋化蛋白-4（MCP-4）再与HRP标记的单核细胞趋化蛋白-4（MCP-4）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的单核细胞趋化蛋白-4（MCP-4）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人单核细胞趋化蛋白-4（MCP-4）浓度。
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