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人B细胞活化因子受体(BAFF-R)ELISA试剂盒
人B细胞活化因子受体(BAFF-R)ELISA试剂盒
更新时间:2017-03-15
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厂商性质: 生产厂家

人B细胞活化因子受体(BAFF-R)ELISA试剂盒价格公道、*,售后服务完整,并提供免费代检测服务!需要产品说明书及其它详细信息请直接与我们。

人B细胞活化因子受体(BAFF-R)ELISA试剂盒产品概述:

产品名称:人B细胞活化因子受体(BAFF-R)ELISA试剂盒

英文名称:Human BAFF-R ELISAKit

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实验原理:

  本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本B细胞活化因子受体(BAFF-R)水平。用纯化的人B细胞活化因子受体(BAFF-R)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入B细胞活化因子受体(BAFF-R),再与HRP标记的B细胞活化因子受体(BAFF-R)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过*洗涤后底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的B细胞活化因子受体(BAFF-R)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人B细胞活化因子受体(BAFF-R)浓度。

酶联免疫吸附试验

       ①直接法    该方法直接利用抗原 与酶联抗体的结合,较简单易行。A.假抗原。在聚苯乙烯酶标版的孔穴中加入待检测的抗原(捕食者胃内含物抽提液)0.2mL,在4℃冰箱中过一夜,使抗原黏附于塑料孔壁上。B.洗涤两次,倒置于干毛巾上,使孔穴中的液体尽量流出。c.加酶联抗体。 各孔穴中加入酶联抗体0.2mL,在mL37℃下孵育3h,使其充分结合。d. 加底物。 用PBS充分洗涤以除去未结合的酶联抗体,然后加入底物(邻苯二胺)0.2 mL,于37℃反应30min,用2mol/L硫酸0.05 mL终止反应。e. 用ELISA检测仪测定其吸光度值,分别设阳性、阴性和空白对照,以确定阳性反应临界值。

        ②双抗体夹心法   该方法与直接法的不同在于吸附抗体。a. 包被抗体。酶标板的孔穴中加入0.2 mL抗体(用PH=9.6/0.05mol/L碳酸盐缓冲液稀释),置37℃水浴中孵育3h,移入4℃冰箱过一夜。将各孔中多余的抗体倾去,加入PBS洗涤,立即甩去,再将PBS加满各板孔,置5min,甩去溶液,如此洗涤2次,倒置于干毛巾上,使孔穴中的液体尽量流出。b. 加待检抗原。没孔中加入待检捕食者胃内含物抽提液0.2 mL.同时设阳性、阴性和空白(PBS)对照,37℃水溶中孵育3h,转入冰箱中过一夜。如上法洗涤3次。C. 加入酶联抗体。每孔加入酶联抗体0.2 mL,37℃水浴孵育2h,如上法洗涤3次。d. 加底物。 每孔加入底物邻苯二胺0.2 mL, 37℃水浴孵育1h,加入2mol/L硫酸0.05,以终止反应。e. 用 ELISA检测仪测定其吸光度值。

       ③间接法  与前两种方法不同点在于酶联抗体与抗原的间接结合。a. 每孔加入待检抗原0.2 mL ,4℃冰箱中过一夜,使抗原黏附于塑料孔壁上。并依上法洗涤3次。b. 每孔加0.2 mL,用PBS稀释的抗体,37℃孵育2-3h。c.用PBS洗涤3次后,加入溶于PBS的酶联抗体0.2mL,37℃孵育2-3h。d. 加底物,方法同上。e. 用ELISA检测.

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