| 更新时间： | 2021-02-04 |
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| 厂商性质： | 生产厂家 |
提供商: 上海研谨生物服务名称: 石蜡冰冻切片TUNEL凋亡荧光规格: 实验服务周期： 1-2周价格： 15元收费标准/服务周期/提供结果:欢迎咨询详谈，我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。更多实验技术服务请浏览网站其他内容,或来电详询!
一、石蜡冰冻切片TUNEL凋亡荧光实验原理：
dUTP缺口末端标记(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling，TUNEL) 法检测细胞凋亡的原理是当细胞发生凋亡时,DNA内切酶被激活，核小体间的基因组DNA被切断，暴露的3-0H可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TerminalDeoxynucleotidyl Transferase, TdT)加上带有荧光素FITC标记的dUTP,从而可以通过荧光显微镜进行检测。
二、石蜡冰冻切片TUNEL凋亡荧光实验意义：
1.TUNEL法是一种分子生物学与形态学相结合的研究方法，可对完整的单个凋亡细胞或者凋亡小体进行原位染色，可以准确反映细胞凋亡典型的生物化学和形态特征。
2.可用于石蜡切片、冰冻切片、培养的细胞等进行细胞凋亡检测，灵敏度远比一般的组织化学和生物化学方法要高。
3.操作简便快捷，在细胞凋亡的研究中被广泛采用。
三、TUNEL凋亡荧光实验步骤:
1.石蜡切片TUNEL显色法:
①石蜡切片常规脱蜡至水，脱蜡剂= =甲苯，至水剂乙醇;
②PBS漂洗3*5 min; .
③加入蛋白酶K工作液379C反应15-30 min, PBS漂洗3x5 min;
④4%多聚甲醛(pH7 4的PBS)室温固定15-30 min, PBS漂洗3x5 min;
⑤浸入封闭液(3%H202)室温封闭10 min, PBS漂洗3x5 min;
⑥参考使用试剂盒的说明书配制适量的TUNEL检测液，其中含有TdT酶、荧光标记液、TUNEL检测液;
⑦样品上加入适量TUNEL检测液，37°C避光孵育60 min, PBS漂洗3x5 min;
⑧选择是否用DAPI复染细胞核;
⑨使用抗荧光淬灭封片液封片后在荧光显微镜下进行观察。
2.冰冻切片TUNEL显色法:
①新鲜组织经处理后，立即在恒冷冰冻切片机内切片，厚度为5~6 um;
②防脱玻片，贴片，室温阴干约12h;③4%多聚甲醛(pH7 .4的PBS)室温固定10 min,
PBS漂洗3x5 min;
④浸入封闭液(3%H20O2) 室温封闭10 min, PBS漂洗3x5 min;
⑤浸入通透液(0.1%Triton X-100溶于PBS中)，室温通透30 S-2 min;
⑥参考使用试剂盒的说明书配制适量的TUNEL检测液，其中含有TdT酶、荧光标记液、TUNEL检测液;
⑦样品上加入适量TUNEL检测液，37°C避光孵育60 min, PBS漂洗3x5 min;
⑧选择是否用DAPI复染细胞核:
⑨使用抗荧光淬灭封片液封片后在荧光显微镜下进行观察。
四、结果展示
实验完成周期及交付标准
1.实验周期: 1-2周
2.交付标准:蜡块、切片、染色图片.实验报告(实验步骤、试剂、耗材等)
需确认的信息
1.样本的种属
2.样本的类型(固定的组织or蜡块or切片)
3.是否提供试剂盒
4.拍照要求
实验代做服务：
| 免疫组化IHC染色实验服务 | 细胞、组织TUNEL凋亡染色实验服务 | 试剂盒免费代检测 | 实验室代做实验项目
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| 透射电镜服务实验服务 | 石蜡/冰冻切片TUNEL凋亡 | 核仁组成区嗜银-AGNOR染色实验服务 | 免疫共沉淀（CHIRP）实验 |
| RNA结合蛋白免疫沉淀（RIP）实验代做 | 酶联免疫（ELISA）技术服务 | 鸡传染性法氏囊病病毒VP2抗体诊断试剂盒 | 喹诺酮类快速检测试剂盒 |
| 组织芯片/微阵列定制技术服务
| 染色质免疫沉淀分析(CLIP)实验服务
| 多因子液相芯片技术（Luminex）实验 | 免疫细胞化学ICC实验服务 |
| ATP/ADP检测实验服务 | 蛋白双向(2-D)电泳实验服务 | 蛋白相互作用分析 | 碱性磷酸酶染色实验服务 |
| PKC活性检测实验 | 非标定量实验 （Label-free）
| DIGE技术实验服务 | 端粒酶活性检测实验 |
| 细胞生长曲线的测定 | 扫描电镜服务 | NF-KB p65活性检测实验
| 慢病毒包装实验服务 |
