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猪伪狂犬gE鉴别抗体检测试剂盒
猪伪狂犬gE鉴别抗体检测试剂盒
更新时间:2020-12-11
访问量: 1322
厂商性质: 生产厂家

猪伪狂犬 gE 抗体ELISA 检测试剂盒*中垂询!

猪伪狂犬gE鉴别抗体检测试剂盒产品概述:

 

 

 

猪伪狂犬 gE 抗体ELISA 检测试剂盒说明书

 

【产品名称】

 

英文名称:ELISA Kit for detection of antibody against Pseudorabies virus gE glycoprotein

 

【规格】

 

96T×2/

 

【作用与用途】

 

测定猪血清中猪伪狂 gE 抗体,用于伪狂犬病毒gE 基因缺失疫苗免疫猪与自然感染猪的鉴别诊断

 

【自备器材】

 

1.酶标仪,双波长 450/630nm 滤光片

 

2.精q的微量移液器(单道 1-100μl0.5-10μl、多道 30-300μl

 

3.水浴箱或恒温箱

 

4.微量振荡器

 

5.洗液吸移装置

 

6.一次性枪头(10μl200μl

 

7.去离子水

 

 

【主要组成成份】

 

 

1

PRV-gE 抗原包被板

96T×2

 

 

 

 

 

2

酶标记物

22ml

黄色帽

 

 

 

 

3

样本稀释液

50ml

透明帽

 

 

 

 

4

PRV-gE-IgG 阴性对照血清

1.5ml

绿色帽

 

 

 

 

5

PRV-gE-IgG 阳性对照血清

1.5ml

红色帽

 

 

 

 

6

显色剂

12ml*2

橙色帽

 

 

 

 

7

终止液

12ml

蓝色帽

 

 

 

 

8

20X 浓缩洗涤液

50ml

白色帽

 

 

 

 

9

盖板膜

2 

 

 

 

 

 

10

说明书

1

 

 

 

 

 

 

【样本要求】

 

1本试剂检测的样本为猪血清,样本应无菌采集,2℃~8℃贮存应不超过一周,长期应在-20℃以下保存。

 

【实验准备】

 

1.试剂盒组分回温平衡:试剂盒组分在实验前,先取出置室温 30min,可以获得J结果。

 

2样本稀释:用试剂盒提供的样本稀释液将样本作 40 倍稀释(即:5μl 血清加 195μl 样品稀释液),混合均匀。

 

3.阳性对照阴性对照稀释:用试剂盒提供的样本稀释液将阳性对照血清和阴性对照血清作4倍稀释(即:50μl血清加150μl样本稀释液),混合均匀。

4配制洗涤液:将试剂盒所提供浓缩洗涤液直接用去离子水稀释 20 倍(即 1ml 浓缩洗涤液加 19ml 水),即可使用。注意:使用前要使结晶*溶解。

 

 【检验方法】

 

1.加样:根据样本数量,取所需板条,检测时,设阴、阳性对照各 2 孔,分别加入稀释的阴、阳性对照血清 100μl 于相应孔中。其余为样本孔,每孔加 100μl 用样本稀释液稀释好的样本(可做单孔也可双孔检验)。

 2.温育:加样后,盖上盖板膜,置 37℃温育 30 分钟。

 3洗板:甩去孔内液体,用洗涤液注满反

应板孔,静置 10 秒甩出,洗涤 3 次,后

一次洗涤后在吸水纸上拍干。

 4加酶:每孔加酶标记物 100μl

 5温育:加好酶标记物的反应板盖好盖板

膜,置 37℃温育 30 分钟。

 6洗板:同步骤 3

 7显色:每孔加显色剂 100μl,振荡混匀,

37℃避光反应 10 分钟。

 8终止:每孔加终止液 50μl,振荡 10 秒,

充分混匀,终止后即读数。

 

9.读数:以450nm/ 630nm双波长检测,读取各孔吸光度值(OD 值)。

 

【结果判定】

 

在酶标仪上测各孔的 OD 值。检测结果有效的条件是阳性对照孔的平均 OD ≥0.5,阴性对照孔的平均 OD 值必须<0.1;样品中抗体存在与否,或样本中抗体的相对水平的高低由 S/P 值决定,S/P 值计算时按以下方式处理:

S/P=(样本 OD450/630 值-NCx)/(PCx-NCx),

 

其中 NCx表示阴性对照孔平均 OD450/630 值

 

(0.05 以下的数值按 0.05 计算);PCx表示阳性对照孔平均 OD450/630 值;

 

当样本的 S/P≥0. 25时判为阳性;样品 S/P 值<0.25时判为阴性;

 

【注意事项】

 

1.本试剂盒仅供研究使用。

 2.不要使用过期的试剂盒组分,不要把不同

批次的组分混合使用。

 3.使用试剂盒之前,一定要仔细阅读说明书。

 4.使用前,浓缩的洗涤液应恢复至室温

(20~25℃),并摇动使沉淀溶解(hao

37℃水浴锅中加热5~10分钟),然后用去离

子水作 20倍稀释(例如:50ml的浓缩洗涤液

加上 950ml 蒸馏水),混匀,稀释好的洗涤

液在 2~8℃可以存放 7-10 日。

 5.本试剂盒应按含有传染性材料对待,试验废弃物应经 121℃高压蒸汽灭菌 30 分钟,或5.0g/L 次氯酸钠等消毒剂处理 30 分钟后废弃。

 6.微孔板从冷藏环境中取出时应在室温中平

衡至潮气干尽后方可拆开,未用完的微孔板须放回有干燥剂的铝箔袋并密封 2℃-8℃保存。未用完的液体试剂应盖好瓶盖,与其它配套组份放入试剂盒中于 2℃-8℃避光保存。

 7.应用微量移液器加入样本及试剂,并经常

校对其准确性。

 8.加洗涤液时应做到满而不溢,防止孔口有

游离酶不能洗净或各孔间的交叉污染。

 9.终止液有腐蚀性,若溅到皮肤或衣物上应

立即用大量清水冲洗干净。

 

【储存条件及有效期】

 

2℃~8℃避光保存,防止冷冻,有期

12 个月。

 

【生产日期及批号】

 

详见包装袋和外包装盒。

 

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